2、为什么说HIV-1 O组和N组是可以检测的?
这个问题阐述起来非常麻烦,需要冗长的解释。在解释之前,先引用François Simon教授领导的研究小组关于快速试剂(即人们常说的金标法)对于不同HIV变种检测可靠性的研究,这篇论文发表在2002年的《病毒学方法杂志》上。在评估试验中,François Simon教授使用了9个HIV-1 O组阳性血样及若干HIV-1 N组阳性血样,考虑到HIV-1 N组阳性血样非常稀少,因此他们只检测了凝胶法和快速法试剂,而快速法就包括了我国普遍采用的雅培Determine试剂。试验结果表明,雅培Determine试剂检测出了包括所有的HIV-1 O组和N组等79种不同基因型的阳性血样,灵敏度为100%。从分子生物学的角度看,HIV-1 O组病毒应该比HIV-1 M组和N组更难检测一些,因为O组病毒不同毒株之间氨基酸序列差异较大,尤其是包膜蛋白(env),很难找到合适的共有序列(consensus),而M组和N组病毒的氨基酸序列就相对保守得多。从基因序列数据库(Genbank)可以查到几个N组毒株的氨基酸序列,通过软件分析,可以发现它们之间的基因差异要比M组更小,这一点与雅培实验室的研究小组得到的结论是一致的。因此,我们有理由相信,HIV-1 N组是可以检测的。
科学地讲,任何试剂都不能说可以检测所有的HIV变种,因为现实中无法做到这样的测试。但是,迄今为止并没有发现一种HIV变种它无法被所有的甚至大多数试剂检测。这说明尽管HIV变异和重组很频繁,但并没有违反目前人们认识的规律。另一方面,从概率的角度看,不同试剂检测相当于独立事件,假设每种试剂的漏检率低于千分之一,那三种试剂检测同时漏检的概率就只有十亿分之一。想想看,可能有那么极端的情况出现么?当然,这种分析的前提假设是否合理需要讨论。
现在国外的第四代HIV试剂都普遍加入了HIV-1 O组的合成肽或者重组抗原,例如生物梅里埃(bioMerieux)、雅培(Abbott Laboratories)、伯乐(Bio-Rad Laboratories)等,其实国外很多第三代试剂也就包含了O组抗原。国内试剂在公开文献中很少看到关于其性能评估的研究,因此不是很了解,也无法评价。
从试剂的性能来看,这些著名公司的产品基本上都能够检测出所有的HIV病毒抗体,无论是HIV-1 M组、O组、N组还是HIV-2,这方面的研究论文和评估报告非常多,感兴趣的话可以参阅例如《临床微生物学杂志》(Journal of clinical microbiology)、《病毒学方法杂志》(Journal of virological methods)、《医学病毒学杂志》(Journal of medical virology)等相关论文。
这里给出我认为检测性能最为优异的几种试剂,它们有理由让我们相信其漏检率至少低于千分之一的假设是合理的:
(1)罗氏公司(Roche Diagnostics)的Elecsys HIV Combi
(2)雅培公司(Abbott Laboratories)的Architect HIV Ag/Ab Combo及AxSYM HIV Ag/Ab Combo
(3)Murex Biotech公司(已被雅培收购)的Murex HIV Ag/Ab Combination
(4)拜耳公司(Bayer)ADVIA Centaur HIV 1/O/2 Enhanced Assay
当然,还有其它很多试剂也是非常优秀的,例如生物梅里埃的Vironostika HIV Uniform II Ag/Ab、伯乐的Genscreen HIV Ag-Ab ULTRA等等。推荐上述几种试剂的理由是根据试剂的抗原选择、检测方法以及众多文献给出的性能评估综合的。上述的这几种试剂中除了Murex HIV Ag/Ab属于普通的酶免疫测定(EIA)外,其它都属于化学发光免疫分析,需要在专用的免疫分析仪上使用,像Elecsys 2010电化学发光全自动免疫分析仪、Architect i2000SR/AxSYM全自动免疫分析仪等。因此它们的测试成本要比普通EIA高得多。尽管如此,据我了解,好像国内很多医院已经采用了上述的试剂,但人们对此并不是很了解。后面我会详细解释HIV抗体检测理论上优异的抗原选择,并将普通酶免法与化学发光法做一个简单对比。
参考文献
Makuwa, M., S. Souquiere, M. T. Niangui, P. Rouquet, C. Apetrei, P. Roques, and F. Simon. 2002. Reliability of rapid diagnostic tests for HIV variant infection. J. Virol. Methods 103:183-190.
Bodelle, P., A. Vallari, R. Coffey, C. P. McArthur, M. Beyeme, S. G. Devare, G. Schochetman, and C. A. Brennan. 2004. Identification and genomic sequence of an HIV type 1 group N isolate from Cameroon. AIDS Res. Hum.
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