2、为什么说HIV-1 O组和N组是可以检测的？

猪猪侠

这个问题阐述起来非常麻烦，需要冗长的解释。在解释之前，先引用François Simon教授领导的研究小组关于快速试剂（即人们常说的金标法）对于不同HIV变种检测可靠性的研究，这篇论文发表在2002年的《病毒学方法杂志》上。在评估试验中，François Simon教授使用了9个HIV-1 O组阳性血样及若干HIV-1 N组阳性血样，考虑到HIV-1 N组阳性血样非常稀少，因此他们只检测了凝胶法和快速法试剂，而快速法就包括了我国普遍采用的雅培Determine试剂。试验结果表明，雅培Determine试剂检测出了包括所有的HIV-1 O组和N组等79种不同基因型的阳性血样，灵敏度为100%。
    从分子生物学的角度看，HIV-1 O组病毒应该比HIV-1 M组和N组更难检测一些，因为O组病毒不同毒株之间氨基酸序列差异较大，尤其是包膜蛋白（env），很难找到合适的共有序列（consensus），而M组和N组病毒的氨基酸序列就相对保守得多。从基因序列数据库（Genbank）可以查到几个N组毒株的氨基酸序列，通过软件分析，可以发现它们之间的基因差异要比M组更小，这一点与雅培实验室的研究小组得到的结论是一致的。因此，我们有理由相信，HIV-1 N组是可以检测的。
    科学地讲，任何试剂都不能说可以检测所有的HIV变种，因为现实中无法做到这样的测试。但是，迄今为止并没有发现一种HIV变种它无法被所有的甚至大多数试剂检测。这说明尽管HIV变异和重组很频繁，但并没有违反目前人们认识的规律。另一方面，从概率的角度看，不同试剂检测相当于独立事件，假设每种试剂的漏检率低于千分之一，那三种试剂检测同时漏检的概率就只有十亿分之一。想想看，可能有那么极端的情况出现么？当然，这种分析的前提假设是否合理需要讨论。
    现在国外的第四代HIV试剂都普遍加入了HIV-1 O组的合成肽或者重组抗原，例如生物梅里埃（bioMerieux）、雅培（Abbott Laboratories）、伯乐（Bio-Rad Laboratories）等，其实国外很多第三代试剂也就包含了O组抗原。国内试剂在公开文献中很少看到关于其性能评估的研究，因此不是很了解，也无法评价。
    从试剂的性能来看，这些著名公司的产品基本上都能够检测出所有的HIV病毒抗体，无论是HIV-1 M组、O组、N组还是HIV-2，这方面的研究论文和评估报告非常多，感兴趣的话可以参阅例如《临床微生物学杂志》（Journal of clinical microbiology）、《病毒学方法杂志》（Journal of virological methods）、《医学病毒学杂志》（Journal of medical virology）等相关论文。
    这里给出我认为检测性能最为优异的几种试剂，它们有理由让我们相信其漏检率至少低于千分之一的假设是合理的：
    （1）罗氏公司（Roche Diagnostics）的Elecsys HIV Combi
    （2）雅培公司（Abbott Laboratories）的Architect HIV Ag/Ab Combo及AxSYM HIV Ag/Ab Combo
    （3）Murex Biotech公司（已被雅培收购）的Murex HIV Ag/Ab Combination
    （4）拜耳公司（Bayer）ADVIA Centaur HIV 1/O/2 Enhanced Assay
    当然，还有其它很多试剂也是非常优秀的，例如生物梅里埃的Vironostika HIV Uniform II Ag/Ab、伯乐的Genscreen HIV Ag-Ab ULTRA等等。推荐上述几种试剂的理由是根据试剂的抗原选择、检测方法以及众多文献给出的性能评估综合的。上述的这几种试剂中除了Murex HIV Ag/Ab属于普通的酶免疫测定（EIA）外，其它都属于化学发光免疫分析，需要在专用的免疫分析仪上使用，像Elecsys 2010电化学发光全自动免疫分析仪、Architect i2000SR/AxSYM全自动免疫分析仪等。因此它们的测试成本要比普通EIA高得多。尽管如此，据我了解，好像国内很多医院已经采用了上述的试剂，但人们对此并不是很了解。后面我会详细解释HIV抗体检测理论上优异的抗原选择，并将普通酶免法与化学发光法做一个简单对比。
参考文献
[1] Makuwa, M., S. Souquiere, M. T. Niangui, P. Rouquet, C. Apetrei, P. Roques, and F. Simon. 2002. Reliability of rapid diagnostic tests for HIV variant infection. J. Virol. Methods 103:183-190.
[2] Bodelle, P., A. Vallari, R. Coffey, C. P. McArthur, M. Beyeme, S. G. Devare, G. Schochetman, and C. A. Brennan. 2004. Identification and genomic sequence of an HIV type 1 group N isolate from Cameroon. AIDS Res. Hum.