艾滋病检测方法的详细介绍

疾控江姐

艾滋病主要的检测方法分为：抗体检测、抗原检测、核酸检测病毒分离

（一）抗体检测分为：

          酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光试验（IFA）、快速检测法（通常叫金标法): 也是抗体检测的一种方法，根据免疫层

析法的原理，用于HIV抗体检测的定性检测。

（二）抗原检测分为：

          解离免疫复合物法或浓缩P24抗原:  用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太

少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。


（三）核酸检测

       PCR法检测HIV基因:用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾

滋病的研究中。


（四）病毒分离

      共培养法:即用正常人外周血液分离单个核细胞，加PHA刺激并培养后，加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。



各种方法解释：

1、酶联免疫吸附试验（ELISA）--酶联法：
ELISA法的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物，酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计观察结果。初筛用的HIV ELISA试剂目前已经发展到第四代检测试剂。第一代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体。由于包被的抗原不很纯,假阳性率较高。第二代试剂使用基因工程方法得到的重组抗原和合成肽包被反应板，由于纯化抗原的使用,特异性有了很大提高。第三代试剂使用双抗原夹心法检测抗体,进一步提高了敏感性。第四代试剂则在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测,把HIV抗原和抗P24的抗体同时包被反应板,可同时检测血清中的HIV抗体和P24抗原。

2、免疫荧光试验（IFA）：
免疫印迹试验主要用于确认试验，基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS?PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原?抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。有报告说，免疫印迹试验的特异性不是很好, 有大约2％的假阳性率，但免疫印迹试验依然是目前最常用的HIV确认试验。

3、金标法:我们知道，在进行艾滋病检测时，会通过显示或不显示红线来表示检测结果，那么为什么艾滋病检测试纸会有红线呢？这是因为当HIV抗体与艾滋病检测试纸上特有的物质相遇后，会发生化学反应，然后显示出一条红线。采用金标法的艾滋病检测试纸，如艾康艾滋病检测试纸，上面的特有物质叫做胶体金，这就是金标法。通俗的讲，就是利用胶体金与HIV抗体反应，然后显示红线的方法。